多肽合成常见问题解答

下面多肽定制给大家介绍下多肽合成常见问题

什么是净肽含量？

理解净肽含量和全肽含量的不同很重要，净肽含量是相对于非肽类物质、大部分的平衡离子以及水分而言的肽的百分比。净肽含量可以通过氨基酸分析进行测定，如果您需要这方面的服务请向我们提供应用请求。通常亲水性多肽即便在严格的冻干条件下仍能吸收小分子水分。净肽含量会随着一次次的纯化和冻干步骤发生变化。

多肽如何合成？

与天然蛋白的合成不同，多肽的合成是从C 端到N 端。我们所采用的多肽合成技术主要根据Fmoc 和t-Boc化学法保护α-氨基以实现多肽合成。脱保护试剂（哌啶脱除Fmoc；TFA脱出Boc）解除α-氨基的保护基团以保证序列中下一个氨基酸的耦合。，这个暴露的氨基会与接下来活化的氨基酸形成肽键。当合成完成时，多肽会从树脂上切下来并脱去保护。此时多肽可以沉淀、清洗并最终冷冻干燥得到所要的产品。

固相多肽合成切割方法

固相多肽合成完成之后，必须选择合适的切割试剂将多肽从树脂上切割下来，然后经过冰乙醚沉淀，离心收集沉淀，经过HPLC分离纯化，冷冻干燥得到最后产品。由于选择的树脂不同，氨基酸序列不同，在切割时候，选择的切割方法也不完全相同，一般都是选择酸性条件下切割的条件，对于Wang，Rink-Amide，2-Cl脂，一般采用TFA切割，切割过程中加入，乙二硫醇，苯甲硫醚，水，三异丙基硅烷，苯酚等。这些添加试剂主要作为碳正离子俘获试剂使用，目的是俘获切割反应过程中生成的碳正离子，减少这些碳正离子对部分氨基酸侧链的进攻导致的副反应。切割试剂用量一般10-15ml/g树脂。常用的切割配比： TFA/TIS/EDT/H2O（94/1/2.5/2.5），反应一般是在室温条件下2h-4h。

多肽合成中树脂的用量

拿到客户的订单，我们会根据客户的需求（重量、纯度、盐成分）结合序列的难易度，预估一个生产总收率。通过收率可以计算出合成规模，用合成规模除以树脂的取代度，就可以得到需要树脂的量了。

关于多肽吸潮的问题

多肽在溶解和储存时，应遵循下列要点： 多肽长期保存应放置在-15℃以下。多肽容易吸潮，应先把装有多肽的瓶放在玻璃器中，至于室温下平衡温度，然后才能打开瓶称量多肽，多肽吸收水分后将影响稳定性使多肽含量减少。从瓶中称出所需量的多肽后，应立刻将瓶盖拧紧。

多肽应溶解在适当的溶液中：酸性多肽应溶解在碱性溶液中，碱性多肽应溶解在酸性溶液中。必要时可用超声波帮助溶解。多肽含有Trp,Met,Cys应该特别注意免氧化.应该用无氧的水或还原剂.*储存时,多肽溶液应该分装后置于-15℃以下,多数含有Trp,Met,Cys的多肽半衰期较短,不应长期保存。

特殊多肽合成中存在的问题

由于每一种多肽有它特殊的特征并且不是所有的结果都被预期到。如果我们在合成中出现一些问题同时不能及时发货，我们会及时与您进行沟通。

以上就是多肽厂家给大家介绍的相关内容，希望对大家有所帮助。