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多肽合成常见问题解答

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多肽合成常见问题解答

发布日期:2019-10-26 作者:江苏吉泰肽业科技有限公司 点击:

下面多肽定制给大家介绍下多肽合成常见问题

什么是净肽含量?

理解净肽含量和全肽含量的不同很重要,净肽含量是相对于非肽类物质、大部分的平衡离子以及水分而言的肽的百分比。净肽含量可以通过氨基酸分析进行测定,如果您需要这方面的服务请向我们提供应用请求。通常亲水性多肽即便在严格的冻干条件下仍能吸收小分子水分。净肽含量会随着一次次的纯化和冻干步骤发生变化。

多肽如何合成?

与天然蛋白的合成不同,多肽的合成是从C 端到N 端。我们所采用的多肽合成技术主要根据Fmoc 和t-Boc化学法保护α-氨基以实现多肽合成。脱保护试剂(哌啶脱除Fmoc;TFA脱出Boc)解除α-氨基的保护基团以保证序列中下一个氨基酸的耦合。,这个暴露的氨基会与接下来活化的氨基酸形成肽键。当合成完成时,多肽会从树脂上切下来并脱去保护。此时多肽可以沉淀、清洗并最终冷冻干燥得到所要的产品。

固相多肽合成切割方法

固相多肽合成完成之后,必须选择合适的切割试剂将多肽从树脂上切割下来,然后经过冰乙醚沉淀,离心收集沉淀,经过HPLC分离纯化,冷冻干燥得到最后产品。由于选择的树脂不同,氨基酸序列不同,在切割时候,选择的切割方法也不完全相同,一般都是选择酸性条件下切割的条件,对于Wang,Rink-Amide,2-Cl脂,一般采用TFA切割,切割过程中加入,乙二硫醇,苯甲硫醚,水,三异丙基硅烷,苯酚等。这些添加试剂主要作为碳正离子俘获试剂使用,目的是俘获切割反应过程中生成的碳正离子,减少这些碳正离子对部分氨基酸侧链的进攻导致的副反应。切割试剂用量一般10-15ml/g树脂。常用的切割配比: TFA/TIS/EDT/H2O(94/1/2.5/2.5),反应一般是在室温条件下2h-4h。

多肽合成中树脂的用量

拿到客户的订单,我们会根据客户的需求(重量、纯度、盐成分)结合序列的难易度,预估一个生产总收率。通过收率可以计算出合成规模,用合成规模除以树脂的取代度,就可以得到需要树脂的量了。

关于多肽吸潮的问题

多肽在溶解和储存时,应遵循下列要点: 多肽长期保存应放置在-15℃以下。多肽容易吸潮,应先把装有多肽的瓶放在玻璃器中,至于室温下平衡温度,然后才能打开瓶称量多肽,多肽吸收水分后将影响稳定性使多肽含量减少。从瓶中称出所需量的多肽后,应立刻将瓶盖拧紧。

多肽应溶解在适当的溶液中:酸性多肽应溶解在碱性溶液中,碱性多肽应溶解在酸性溶液中。必要时可用超声波帮助溶解。多肽含有Trp,Met,Cys应该特别注意免氧化.应该用无氧的水或还原剂.*储存时,多肽溶液应该分装后置于-15℃以下,多数含有Trp,Met,Cys的多肽半衰期较短,不应长期保存。

特殊多肽合成中存在的问题

由于每一种多肽有它特殊的特征并且不是所有的结果都被预期到。如果我们在合成中出现一些问题同时不能及时发货,我们会及时与您进行沟通。

以上就是多肽厂家给大家介绍的相关内容,希望对大家有所帮助。

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