新闻分类

联系我们

江苏吉泰肽业科技有限公司

联  系  人 :秦经理

座        机 :0515-68113000

手        机:13816538946

邮        箱:info@gtaipeptide.com

地        址:江苏省盐城市滨海县新安大道799号

网        址:www.gtaipeptide.com

邮        编:224500



多肽的溶解和保存

您的当前位置: 首 页 >> 新闻中心 >> 行业新闻

多肽的溶解和保存

发布日期:2016-11-15 作者:江苏吉泰肽业科技有限公司 点击:

按条件溶解多肽

若多肽不溶于纯水,超声处理有助于打碎颗粒并增加溶解度。注意:超声处理会引起溶液发热和多肽降解。

若多肽中包含多个碱性氨基酸,使用1~10%的乙酸水溶液;对于疏水性非常强的多肽,则使用50%乙酸。

若多肽中含有大量酸性氨基酸,可用1~10%氨溶液或乙酸乙基吗啡或重碳酸盐等挥发性的碱性缓冲液溶解。pH值在层析前必须调整。

异丙醇和乙腈能溶解中等大小的肽。若肽要上柱,有机溶剂的量则必须很少,否则将严重影响滞留时间。

若多肽因为含有Val、Leu、Met、Phe、Tyr、Ala等芳烃侧链而高度疏水,或为中性肽时,DMF或DMSO等膜变性剂的使用,有助于多肽的溶解。

a. 高浓度膜变性剂通过破坏多肽的二级结构而助溶。

b. 膜变性剂适于多肽分析液的制备,但可能会对其生物活性的研究工作造成干扰。

c. DMF是最佳变性剂(最高浓度可达30%),滴加至多肽溶解。

d. 反相层析时,DMF将与洗脱液前峰一起流出,依进样量的多少,峰值可能很高。大多数肽能在大量DMF流出后几分钟内流出,若肽链很小,洗脱太早,多肽的量将降低。  

      

冻干多肽的保存

   所有标明“保持冻干”的产物,都必须保存在冰冻条件下,最好-20℃,若保存在-10℃以下,大多数肽可维持几年的活性。

当使用冰冻产品时,开盖之前,瓶或试管应在装有新鲜干燥剂的干燥箱内升至室温。对于保存于-20℃的产品,这个过程需要一小时或更长,随包装大小而异。否则,当瓶打开时,水气进入导致多肽凝缩而降低其稳定性。一旦打开,应迅速称量完毕,并立即密闭以免潮解,尤其亲水肽更应注意。   

      

多肽溶液的保存     

   多肽溶液比干粉的稳定性差很多,为了得到最好结果,遵循下列原则:

反复冻融有损于肽的活性,所以建议分装成小包装保存。需要多少解冻多少,用后弃掉剩余物。

溶于pH5~7无菌的缓冲液中,贮存于-20℃。

包含Cys、Met、Try、Glu、Asp的多肽易于氧化,因此须保存在无氧化剂的环境中。

由于细菌能降解多肽,因此贮存前必须过滤除菌。

 

冻干多肽的溶解   

   多肽溶解中的主要问题是二级结构的形成。

虽然疏水肽链二级结构的形成更明显,但除了最短的肽链外,该现象发生在几乎所有肽链,与极性无关。因此,溶解多肽的第一个原则是用无菌的蒸馏水或去离子水(如果条件允许则用无氧水)。

多肽溶液可能遇到细菌降解。为避免该现象的发生,多肽应溶解在无菌的蒸馏水中,或者用0.45或0.2µm孔径的滤膜过滤除菌。

包含Cys、Met、Trp的多肽特别容易氧化,因此应该溶于无氧的水中。无氧水可以通过注入惰性气体(氮、氦、氩)减压除气得到。


相关标签:多肽厂家

最近浏览:

在线客服
分享
欢迎给我们留言
请在此输入留言内容,我们会尽快与您联系。
姓名
联系人
电话
座机/手机号码